Меню

Последствия аденовирусного конъюнктивита

Оглавление:

Аденовирусный конъюнктивит

. или: Адено-фаринго-конъюнктивальная лихорадка Эпидемический фолликулярный конъюнктивит

Симптомы аденовирусного конъюнктивита

  • При аденовирусном конъюнктивите наиболее часто сперва поражается один глаз, затем второй.
  • Отделяемое из глаз: как правило, скудное, слизистое (прозрачное).
  • Слипание век (особенно по утрам) из-за отделяемого из глаз.
  • Ощущение инородного тела в глазу.
  • Чувство сухости и жжения в глазах.
  • Слезотечение.
  • Светобоязнь (невозможность смотреть на яркий свет).
  • Отек конъюнктивы (слизистой оболочки глаза).
  • Отек и покраснение век.
  • Отек кожи и покраснение вокруг глаз.
  • Гиперемия (покраснение) конъюнктивы.
  • Конъюнктивальная инъекция (глаза краснеют, становятся видны сосуды).
  • Могут быть симптомы общего недомогания: слабость, сонливость, повышение температуры тела, озноб.
  • Возможно появление кашля, насморка, боли в горле, увеличения лимфатических узлов.
  • По течению заболевания:
    • острый аденовирусный конъюнктивит – человек заболевает внезапно, симптомы очень сильно выражены, проходят после проведенного лечения;
    • подострый вирусный конъюнктивит – симптомы менее выражены, проходят после проведенного лечения.
  • По этиологии (происхождению) возбудителя:
    • аденовирусный конъюнктивит (адено-фаринго-конъюнктивальная лихорадка) – чаще этой формой конъюнктивита болеют дети, вспышки заболевания наблюдаются в основном весной; заболевание начинается с симптомов простуды – кашля, насморка, повышения температуры тела, увеличения и болезненности лимфатических узлов, затем присоединяются симптомы конъюнктивита – слезотечение, светобоязнь, покраснение конъюнктивы и т.д. При этой форме вирусного конъюнктивита высока вероятность поражения других частей глаза и развития осложнений. Аденовирусный конъюнктивит может протекать в трех вариантах:
      • катаральный аденовирусный конъюнктивит – наиболее легкий вариант заболевания, симптомы выражены незначительно, быстро наступает выздоровление;
      • пленчатый аденовирусный конъюнктивит – на поверхности конъюнктивы появляются сероватые пленочки, после удаления которых образуются язвы (поверхностные кровоточащие дефекты конъюнктивы);
      • фолликулярный аденовирусный конъюнктивит – на поверхности конъюнктивы образуются фолликулы (пузырьки), после которых могут оставаться рубцы, приводящие к снижению остроты зрения (способности глаза видеть окружающие предметы ясно и четко).
    • эпидемический фолликулярный конъюнктивит – эта форма конъюнктивита вызывается аденовирусами 8 и 19 серотипов. В основном, поражает взрослое население. Заболевание очень заразно. Одновременно им могут болеть целые семьи и коллективы. Заболевание начинается остро (внезапно) и характеризуется быстрым прогрессированием симптомов конъюнктивита. Для этой формы характерно одновременное поражение обоих глаз.

Причиной возникновения вирусного конъюнктивита чаще всего является семейство вирусов (организмов, которым для осуществления процессов своей жизнедеятельности необходимо паразитировать (получать все важные ресурсы) в клетках других организмов) Аденовирусы.

Факторами, способствующими развитию аденовирусного конъюнктивита,являются:

  • общее снижение иммунитета;
  • переохлаждение;
  • чрезмерная инсоляция (воздействие солнечных лучей);
  • отсутствие полноценного питания;
  • перенесенные инфекции.

Врач терапевт поможет при лечении заболевания

Диагностика

  • Анализ анамнеза заболевания и жалоб –когда (как давно) у пациента появились жалобы на слипание век, особенно по утрам, слезотечение, светобоязнь (невозможность смотреть на яркий свет), покраснение глаз; отек век или кожи вокруг глаз; человек может жаловаться на наличие отделяемого из глаз – чаще всего скудного слизистого (прозрачного). Также пациент может жаловаться на общее недомогание: слабость, сонливость, повышение температуры тела и симптомы простуды (кашель, насморк, боль в горле).
  • Анализ анамнеза жизни —врач выявляет, были ли у пациента в недавнем прошлом переохлаждения, перегревания, простудные заболевания; не контактировал ли пациент с людьми, болеющими конъюнктивитом.
  • Бактериоскопическое исследование мазков отделяемого с конъюнктивы –предметное стекло с нанесенным на него отделяемым смотрят под микроскопом, таким образом определяя наличие или отсутствие бактерий, грибов или других инородных предметов для исключения диагноза бактериального конъюнктивита или присоединения вторичной бактериальной инфекции (т.е. на фоне уже имеющегося вируса бактерии активизируются и поражают глаз).
  • Бактериологический посев – помещение отделяемого с конъюнктивы на специальные питательные среды (вещества, на которых микроорганизмы лучше растут): если в отделяемом присутствуют бактерии, то на питательной среде появится колония этих бактерий – пятно неправильной формы и различного цвета (в зависимости от вида бактерий). Исследование также проводят для исключения диагноза бактериального конъюнктивита или присоединения вторичной бактериальной инфекции.
  • Цитологический соскоб –выполняется с помощью скальпеля (специального медицинского ножа), скальпелем удаляется несколько слоев клеток с конъюнктивы, которые в дальнейшем рассматриваются под микроскопом.
  • Биомикроскопия глаза —бесконтактный метод диагностики заболеваний глаз с помощью специального офтальмологического микроскопа, совмещенного с осветительным прибором.

Комплекс « микроскоп-осветительный прибор» называется щелевой лампой. С помощью этой несложной методики можно выявить степень поражения глаза вирусом.

Лечение аденовирусного конъюнктивита

  • Противовирусные глазные капли.
  • Антибактериальные (противомикробные средства) глазные капли – для профилактики присоединения вторичной бактериальной инфекции (на фоне уже имеющегося вируса бактерии активизируются и поражают глаз).
  • Антибактериальные глазные мази – для профилактики присоединения вторичной бактериальной инфекции.
  • Глюкокортикостероидные капли или мази — противовоспалительные средства, уменьшают отек конъюнктивы и окружающих тканей глаза.

Осложнения и последствия

  • Снижение остроты зрения вследствие возникновения кератита — воспаления роговицы (прозрачной оболочки глаза) при ее вовлечении в процесс с последующим ее рубцеванием.
  • Инфицирование других отделов глазного яблока вплоть до последующей его потери (например, блефароконъюнктивит — сочетание конъюнктивита с блефаритом (воспалением век)).
  • Рубцы конъюнктивы.
  • Рубцы роговицы.
  • Снижение остроты зрения.
  • Потеря зрения.

Профилактика аденовирусного конъюнктивита

  • Обязательное мытье рук.
  • Использование только своего полотенца во время гигиенических процедур.
  • Использование одноразовых салфеток вместо носовых платков.
  • Избегать натирания глаз грязными руками.
  • Избегать контакта с людьми, больными конъюнктивитами.
  • При неблагоприятных погодных факторах стараться защитить глаза темными очками или головным убором.

Дополнительно

  • Офтальмология. Национальное руководство. Под редакцией С.Аветисова, Е.Егорова и др., « Гэотар-Медиа», 2013.
  • Клиническая офтальмология. В.И.Лазаренко и соавторы, Ростов-на-Дону, Феникс, 2007.

Что делать при аденовирусном конъюнктивите?

  • Выбрать подходящего врача терапевт
  • Сдать анализы
  • Получить от врача схему лечения
  • Выполнить все рекомендации

Аденовирусный конъюнктивит

Аденовирусный конъюнктивит (фаринго-конъюнктивальная лихорадка) – это инфекционно-воспалительное заболевание, вызываемое аденовирусами и протекающее с признаками поражения конъюнктивы (отечность век, отделяемое из глаз, жжение, боль), симптомами назофарингита и повышением температуры тела. Вспышки заболевания чаще всего регистрируются в холодное время года среди детей, посещающих организованные коллективы.

Причины и факторы риска

Спорадические случаи аденовирусного конъюнктивита чаще всего вызываются аденовирусами IV, VI, VII и X типа. Эпидемические случаи обычно бывают обусловлены аденовирусами III, VIIa и XI типа.

Инфекция передается контактно-бытовым или воздушно-капельным путем. При чихании, кашле или через грязные руки аденовирус попадает на слизистую оболочку глазного яблока.

Факторами риска, повышающими риск развития аденовирусного конъюнктивита, являются:

  • стрессы;
  • переохлаждение;
  • травмы органа зрения (в том числе операционные);
  • несоблюдение правил ношения и ухода за контактными линзами;
  • купание в общественных бассейнах и открытых водоемах.

От момента инфицирования и до момента появления первых симптомов аденовирусного конъюнктивита проходит от 2 до 10 дней (в большинстве случаев длительность инкубационного периода составляет 5–7 дней). В процессе жизнедеятельности аденовирусы приводят к деструкции клеток эпителия, которая характеризуется гипертрофией ядрышек, распадом хроматина, вакуолизацией.

Формы заболевания

В зависимости от особенностей клинического течения выделяют три формы аденовирусного конъюнктивита:

Первые две формы заболевания могут наблюдаться у пациентов любого возраста, а последняя встречается преимущественно у детей.

В большинстве случаев аденовирусный конъюнктивит через 15–30 дней заканчивается полным выздоровлением.

Симптомы аденовирусного конъюнктивита

Первыми симптомами аденовирусного конъюнктивита являются:

Через несколько дней температура тела снижается, а потом происходит ее повторное повышение. В этот момент у пациентов появляются признаки поражения конъюнктивы сначала одного, а затем и другого глаза:

  • покраснение и отечность век;
  • зуд;
  • жжение;
  • ощущение инородного тела;
  • нерезкий блефароспазм;
  • светобоязнь;
  • слезотечение;
  • необильное отделяемое слизистого или слизисто-гнойного характера.

Гиперемия (покраснение) конъюнктивы охватывает все ее отделы, а также распространяется на нижнюю и полулунную складку, слезное мясцо.

Для катаральной формы аденовирусного конъюнктивита характерны незначительно выраженные симптомы местного воспаления. Количество отделяемого незначительно, покраснение слизистой оболочки глаз умеренное. Длительность заболевания не превышает недели. Осложнения со стороны роговицы не развиваются.

При фолликулярном аденовирусном конъюнктивите на слизистой оболочке глаз появляются фолликулы (небольшие пузырьки) размером 1-2 мм, заполненные полупрозрачным студенистым содержимым. Они могут покрывать всю поверхность слизистой оболочки или же концентрироваться в уголках век.

Внимание! Фотография шокирующего содержания.
Для просмотра нажмите на ссылку. Аденовирусный конъюнктивит у детей в 25% случаев представлен пленчатой формой. Для заболевания характерно появление на конъюнктиве тонких нежных пленок серовато-белого цвета. В большинстве случаев их легко можно удалить ватным тампоном, но иногда они принимают вид плотных фиброзных отложений, спаянных со слизистой оболочкой. В этом случае они удаляются с трудом, после удаления участки конъюнктивы под ними кровоточат. У некоторых пациентов образуются инфильтраты и кровоизлияния в подъконъюнктивальном пространстве. После выздоровления они полностью рассасываются. При пленчатом аденовирусном конъюнктивите у детей и у большинства взрослых страдает общее состояние: повышается температура тела до 38,5–39,5 °С, появляется общее недомогание, слабость, головная боль. Продолжительность лихорадочного периода составляет от 3 до 10 дней.

Диагностика

Предположить фаринго-конъюнктивальную лихорадку у пациента можно при выявлении в анамнезе указания на контакт с больным, страдающим этим заболеванием. При проведении осмотра обращают внимание на сочетание признаков конъюнктивита с регионарной лимфаденопатией и воспалением верхнего отдела дыхательного тракта.

Подтверждение диагноза осуществляется вирусологическими, цитологическими и серологическими методами исследования. Для ранней диагностики заболевания используют иммунофлюоресцентный метод, который позволяет выявлять в отделяемом слизистой оболочки глаза специфические вирусные антигены.

Читайте так же:  Как по-английски неврит

Обнаружить ДНК аденовируса в соскобе с конъюнктивы можно при постановке полимеразной цепной реакции (ПЦР), отличающейся высокой информативностью. Иммуноферментный анализ (ИФА), реакция связывания комплимента (РСК) позволяют определить содержание антител к аденовирусам в сыворотке крови. При аденовирусном конъюнктивите диагностическим критерием является возрастание концентрации антител не менее чем в 4 раза.

Для выделения и идентификации аденовирусов на клеточной культуре выполняют вирусологическое исследование отделяемого с конъюнктивы.

Спорадические случаи аденовирусного конъюнктивита чаще всего вызываются аденовирусами IV, VI, VII и X типа. Эпидемические случаи обычно бывают обусловлены аденовирусами III, VIIa и XI типа.

При фолликулярной форме аденовирусного конъюнктивита проводят дифференциальную диагностику с трахомой. При трахоме фолликулы локализуются в области верхнего века, а кроме того, заболевание не сопровождается лихорадкой и явлениями назофарингита. Пленчатая форма аденовирусного конъюнктивита в некоторых случаях ошибочно принимается за дифтерию глаз.

Лечение аденовирусного конъюнктивита

Терапия аденовирусного конъюнктивита проводится в амбулаторных условиях. В первую неделю заболевания 6–8 раз в сутки проводят инстилляцию в конъюнктивальный мешок противовирусных препаратов. На второй неделе частота их применения снижается до 2-3 раз в сутки. Также могут использоваться мази с противовирусным действием, которые 3-4 раза в день закладывают за веки.

С целью предупреждения присоединения вторичной бактериальной инфекции показано применение глазных капель и мазей с антибиотиками или сульфаниламидными средствами.

В течение курса лечения аденовирусного конъюнктивита пациентам назначаются антигистаминные препараты.

Для профилактики развития ксерофтальмии (синдрома сухого глаза) пациентам рекомендуют несколько раз в день проводить закапывание увлажняющих глазных капель типа «искусственная слеза».

Возможные последствия и осложнения

Несвоевременно начатое или неадекватное лечение аденовирусного конъюнктивита может стать причиной развития осложнений:

В большинстве случаев прогноз благоприятный, через 15–30 дней заканчивается полным выздоровлением. Если у пациента формируется синдром сухого глаза, возникает необходимость на протяжении долгого времени использования увлажняющих глазных капель.

Профилактика

Профилактика заражения аденовирусным конъюнктивитом включает своевременную изоляцию заболевших детей из организованного коллектива, проведение регулярной влажной уборки, проветривание помещений, а также тщательное соблюдение правил личной гигиены.

В бассейнах необходим тщательный контроль хлорирования и соответствия воды действующим санитарным нормам.

Для профилактики ятрогенного заражения пациентов аденовирусной инфекцией следует выполнять тщательную стерилизацию и дезинфекцию медицинского инструмента (глазные палочки, пипетки), проводить в офтальмологическом кабинете текущую и генеральную уборку с применением дезинфицирующих средств и последующим кварцеванием.

Видео с YouTube по теме статьи:

Образование: окончила Ташкентский государственный медицинский институт по специальности лечебное дело в 1991 году. Неоднократно проходила курсы повышения квалификации.

Опыт работы: врач анестезиолог-реаниматолог городского родильного комплекса, врач реаниматолог отделения гемодиализа.

Информация является обобщенной и предоставляется в ознакомительных целях. При первых признаках болезни обратитесь к врачу. Самолечение опасно для здоровья!

Чем опасен аденовирусный конъюнктивит? Лечение и возможные осложнения

Аденовирусным конъюнктивитом называют офтальмологическое патологическое заболевание, при наличии которого поражается конъюнктивальная оболочка.

Этот недуг может передаваться от человека к человеку и в основном развивается осенью и весной, когда организм человека наиболее ослаблен, а любая патогенная микрофлора быстро размножается и вызывает патологические процессы.

Что такое аденовирусный конъюнктивит?

Развитию болезни сопутствует поражение конъюнктивы и верхних дыхательных путей аденовирусами, вследствие чего начинают прогрессировать воспалительные процессы.

Чаще всего патология поражает детей и распространяется в детских учреждениях (детские садики, школы и поликлиники).

Код заболевания по МКБ-10 имеет значение H13.1 и расшифровывается как конъюнктивит, вызванный аденовирусом.

На фото можно увидеть симптомы аденовирусного конъюнктивита:

Причины появления заболевания

Развитию болезни способствуют следующие внешние и внутренние факторы:

  • нарушение правил личной гигиены;
  • контакт с заболевшими людьми;
  • переохлаждение организма;
  • травмы глаз различного происхождения.

Виды аденовирусного конъюнктивита

Аденовирусный конъюнктивит традиционно разделяют на три вида, которые различаются по симптоматике:

  • Катаральный вид.
    В таких случаях симптоматика выражена слабо, в глазах могут появляться необильные выделения, покраснения глаз и воспалительные процессы практически отсутствуют.
    В такой форме заболевание протекает около недели, при этом осложнений практически никогда не бывает.
  • Пленчатый вид.
    В таких случаях на конъюнктивальной оболочке могут возникать пленки серо-белого цвета, которые иногда достаточно плотно примыкают в конъюнктиве.
    В таких ситуациях попытки устранить пленки при помощи ватных палочек или тампонов могут привести к кровотечениям.
    Такая форма заболевания считается тяжелой и в качестве последствия недуга на поверхности глазного яблока могут оставаться шрамы и рубцы.
    Сопутствующими симптомами являются лихорадка и повышение температуры тела.
  • Фолликулярный вид.
    Помимо характерных вышеперечисленных симптомов при такой форме слизистая оболочка глаза начинает покрываться студнеобразными пузырьками.

В первую очередь при аденовирусном конъюнктивите наблюдается общее повышение температуры тела, и лишь спустя несколько дней становятся заметны признаки воспалений органов зрения (при этом симптоматика проявляется поочередно сначала на одном глазу, а затем и на втором).

По утрам на краях век начинают образовываться пленки, состоящие из слизистых и гнойных выделений. Веки и конъюнктивальная оболочка глаза отекают, а сам пациент в течение всего периода протекания болезни может чувствовать присутствие в глазах инородного тела.

По симптоматике аденовирусный конъюнктивит близок к бактериальной форме заболевания.

К основным признакам такого недуга относятся:

  • озноб и лихорадка;
  • повышение температуры тела;
  • увеличение объема лимфатических узлов, расположенных в области шеи;
  • острые реакции на свет;
  • кашель;
  • ринит;
  • зуд и жжение;
  • слизистые выделения из глаз;
  • отечности в области век.

Методы лечения

Методы лечения аденовирусного конъюнктивита у взрослых и детей различаются.

Взрослым пациентам обычно предписывается комплексное лечение, так как в настоящее время не существует лекарственных препаратов, точечно воздействующих на аденовирусы.

Основу лечения составляют препараты интерфероны в виде капель.

Их необходимо применять в течение недели, закапывая около 7 раз в день, после чего лечение продолжается еще в течение семи дней, но количество инстилляций сокращается до трех раз в сутки.

Нелишним будет применение антигистаминных препаратов, которые помогают снять отечности.

Среди препаратов, распространенных при аденовирусном конъюнктивите, наибольшую популярность имеют:

  • противовирусное средство теброфен (выпускается в форме мази и капель);
  • альбуцид (антибиотик широкого спектра действия);
  • интерферон (лекарство, активизирующее иммунную систему и оказывающее противовирусное воздействие);
  • полудан (симулятор и аналог интерферона);
  • тобрекс (противомикробные капли антибиотического характера, которые рекомендуется начинать применять с первых дней болезни);
  • противомикробные капли флоксал;
  • флореналь.

Все обозначенные препараты необходимо принимать под строгим контролем врача, а самостоятельный выбор лекарств может обернуться побочными эффектами и осложнениями.

Если не нарушать это правило и строго следовать предписаниям офтальмолога, можно говорить о благоприятном прогнозе лечения аденовирусного конъюнктивита.

Меры профилактики

Главная профилактическая мера против аденовирусного конъюнктивита – изоляция заболевших людей и ограничение контакта с ними.

Следовательно, в больших коллективах, где присутствуют больные, необходимо сократить время общения и избегать физических контактов, чтобы не заразиться.

Также необходимо чаще проветривать жилье и делать влажную уборку хотя бы раз в неделю.

При уходе за пациентом, заболевшим аденовирусным конъюнктивитом, необходимо каждый раз после контакта с ним мыть руки или протирать их влажными салфетками, при этом непосредственно после контакта с пациентом нельзя трогать глаза во избежание занесения инфекции.

Полезное видео

Из данного видео вы узнаете все об аденовирусном конъюнктивите:

Аденовирусный конъюнктивит обычно имеет благоприятные прогнозы и быстро излечивается, если соблюдать рекомендации офтальмолога и не усугублять положение самолечением или злоупотреблением средствами народной медицины.

Обычно признаки заболевания при адекватном лечении пропадают максимум через две недели.

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.07) на тему: Острые и хронические формы аденовирусной инфекции глаз (клинико-иммунологическое исследование)

Автореферат диссертации по медицине на тему Острые и хронические формы аденовирусной инфекции глаз (клинико-иммунологическое исследование)

На правах рукописи

КЛЕЩЕВА Елена Александровна

ОСТРЫЕ И ХРОНИЧЕСКИЕ ФОРМЫ АДЕНОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ ГЛАЗ (КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

14.01.07 — глазные болезни

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена в ГБОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздравсоцразвития России

доктор медицинских наук, профессор Кочергин Сергей Александрович

доктор медицинских наук, профессор Ненашева Наталия Михайловна

Гусева Марина Раульевна — доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И.Пирогова» Минздравсоцразвития России, профессор кафедры глазных болезней педиатрического факультета.

Луцсвич Екатерина Эммануиловна — доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Первый московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова;) Минздравсоцразвития России, профессор кафедры глазных болезней.

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов». Защита состоится «Сб» ИЛ&5|а2012 г. в часов на заседании диссертационного совета Д. 208.071.03 при ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздравсоцразвития РФ по адресу: 123995, г.Москва, ул. Баррикадная, д. 2/1.

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке ГБОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздравсоцразвития России по адресу: 125445, г. Москва, ул. Беломорская, д.19.

Автореферат разослан « 2012г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Мосин Илья Михайлович.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования

Воспалительные заболевания глаз имеют большой удельный вес в структуре всей офтальмопатологии (более 40% амбулаторного приема). Кроме того, на воспалительные заболевания приходится 80% временной нетрудоспособности среди больных с патологией глаз, до 50% стационарных больных, до 10-30% слепоты [Майчук Ю.Ф., 2010]. Более половины больных с воспалительной патологией глаз имеют доказанный или предполагаемый вирусный характер заболевания. Аденовирус является самой частой причиной вирусных и инфекционных конъюнктивитов во всем мире [Robert Р., Sambursky M.D., Nikole Fram, 1962]. О распространенности аденовирусных заболеваний человека свидетельствует тот факт, что 80% населения имеет комплементсвязывающие антитела к аденовирусам [Ацев С., Добрев И., 1965]. Аденовирусные инфекции глаз, проявляющиеся в виде аденовирусного конъюнктивита (ADK) или эпидемического кератоконъюнктивита (ЭКК), отличаются чрезвычайной распространенностью и являются серьезной проблемой здравоохранения. АВК составляет 90% всех случаев вирусных конъюнктивитов и от 15 до 70% случаев инфекционных конъюнктивитов [Маль-ханов В.Б., Грипась И.А., Кудоярова Э.Г., 1987; Казакбаев А.Г., 1989; Краснов М.М., Каспаров А.А., Каспарова Е.А., 1998; Robert P., Sambursky M.D., Nikole Fram, 1962; Ishii К., Nakazono N., Fujinaga K.,1987; Ishii K., Nakazono N., Fujinaga K.; 1987].

Читайте так же:  Какие линзы для астигматизма лучше

Предположение о существовании хронической (латентной) формы течения аденовирусного конъюнктивита высказало в единственной отечественной публикации. В этой же работе приведены данные, свидетельствующие о достаточно высокой частоте затяжных (до 60%) и рецидивирующих (до 33%) форм аденовирусной инфекции глаз [Азнабаев М.Т., Мальханов В.Б., 1995]. Сопоставляя эти данные с чрезвычайной распространенностью данной инфекции, можно гипотетически предположить, что пациенты с хроническим

(стертым, затяжным или рецидивирующим) течением являются значимым

скрытым резервуаром инфекции. Некоторые авторы связывают существование данных форм заболевания со штаммовыми особенностями возбудителя (серотипы 5, 6, 8, 9, 37), снижением общего иммунного фона у населения, а также последствиями нерационально проводимой терапии [Азнабаев М.Т., Мальханов В.Б., 1995; Краснов М.М., Каспаров A.A., Каспарова Е.А., 1998; Марченко Н.Р., Каспарова Е.А., Лосева И.Е., 1998; Коротких С.А., Шеломен-цев H.A., Бобыкин Е.В., 2005]. В зарубежной литературе описаны случаи аденовирусной инфекции глаз, длящиеся 45 и более дней с момента появления первых симптомов заболевания (более 25% всех наблюдаемых случаев аденовирусной патологии глаз) [Butt A.L., Chodosh J., 2006].

Следует особо подчеркнуть, что в системе естественной защиты при вирусных инфекциях контрольно-регуляторная роль принадлежит цитокинам, к самым известным из которых относятся интерфероны. Цитокины, являясь продуктами иммунокомпетентных и других клеток, обеспечивают развитие или подавление воспаления, участвуют в запуске специфического иммунного ответа.

Локальные регуляторные цитокиновые реакции (локальный цитокино-вый статус) изучаются в настоящее время достаточно активно при различной офтальмопатологии [Слепова О.С., 2001; Теплинская Л.Е., Филичкина Н.С., Матевосова К.С., 2005; Шевчук Н.Е., Мальханов В.Б., Марвапова З.Р., 2007; Никитин H.A., Кузбеков Ш.Р., 2009; Kasp-Grochowska Е., Graham Е., Sanders, 1981; Abu el-Asrar A.M., Geboes К., Tabarra K.F., 1996]. Основным объектом исследования локального цитокинового статуса является слезная жидкость, а доминирующим методом — иммуноферментный анализ (определение концентрации свободных цитокинов). В ряде работ прослеживается регуляторная роль цитокинов как медиаторов и катализаторов иммунного ответа при вирусной патологии органа зрения, причем некоторые авторы связывают избыточное повреждение тканей именно с нарушениями функционирования цитокиновой сети как эндогенного (аутоиммунитет), так и экзогенного (вирусы, микробы) характера.

В последние годы бурно развиваются наномедицииские технологии, особенно в области лабораторной диагностики. Разработан и внедрен в широкую практику в различных областях медицины метод мультиплексного анализа, основанный на использовании полистироловых наномикрочастиц (микросфер). В доступной отечественной и зарубежной литературе отсутствуют данные по использованию вышеописанной технологии для изучения закономерностей локального цитокиногенеза при аденовирусных инфекциях органа зрения.

Кроме количественного определения цитокинов, в мировой практике применяется также изучение тканевой экспрессии генов (мРНК) цитокинов методом полимеразной цепной реакции. По мнению отечественных исследователей в данной области науки наиболее полную информацию может дать одновременное применение как определения концентрации цитокинов, так и детекция экспрессии генов-прешественников (мРНК).

Все вышесказанное определило цель нашего исследования.

Определить особенности клинической картины и патогенетическую значимость показателей локальной иммунореактивности на примере специфического иммунного (цитокинового) ответа при острых и хронических формах аденовирусной инфекции глаз.

1 .Дать общую характеристику больных с острыми и хроническими формами течения аденовирусной инфекции глаз.

2.0ценить динамику локальной вирусной нагрузки в процессе развития заболевания с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) при острых и хронических формах течения аденовирусной инфекции.

3.Изучить локальный иммунный статус по продукции генов цитокинов и самих цитокинов клетками конъюнктивы методами полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и проточной флуометрии у здоровых добровольцев.

4.Выявить возможную зависимость клинического течения аденовирусной инфекции глаз от состояния локального иммунного статуса по продукции генов цитокинов и самих цитокинов клетками конъюнктивы.

5.0ценить влияние микрофлоры конъюнктивы на развитие локальных цитокиновых реакций при острых и хронических формах аденовирусной инфекции глаз.

1.Изучена нормальная продукция генов цитокинов и самих цитокинов непосредственно клетками конъюнктивы методами ОТ-ПЦР и проточной цитофлюометрии.

2.Изучена продукция генов цитокинов и самих цитокинов непосредственно клетками конъюнктивы при различных формах аденовирусной инфекции глаз в динамике методами ОТ-ПЦР и проточной флуометрии у пациентов.

3.Исследован состав микрофлоры конъюнктивы, сопутствующей различным формам аденовирусной инфекции глаз.

4.Выявлена значимость методики ПЦР для диагностики аденовирусной инфекции глаз в динамике заболевания при различных формах течения инфекции.

5.Доказана достаточная чувствительность и специфичность метода ПЦР в отношении выявления ДНК аденовируса при острых и хронических формах течения инфекции.

Практическая значимость работы

1.Комплекс знаний о клинических особенностях хронического течения аденовирусной инфекции глаз позволит своевременно выявлять стертые и затяжные случаи этой инфекции, что может способствовать адекватным мероприятиям по предотвращению распространения внутригоспитальной инфекции.

2.Выявленная высокая чувствительность метода полимеразной цепной

реакции к обнаружению ДНК аденовируса позволяет считать его методом

выбора при подозрении на хроническую форму аденовирусной инфекции

глаз при дифференциальной диагностике хронических конъюнктивитов неустановленной этиологии.

3.Методика мультиплексного анализа конъюнктивального соскоба после соответствующих предварительных исследований может быть внедрена в клиническую практику офтальмологов для одномоментного определения десятков и сотен самых разных параметров (цитологии клеток, определения различных патогенов, биохимических показателей и т.д.).

4.Показатели локального иммунного статуса при острых и хронических формах вирусных инфекции глаз заболевания могут служить объективным критерием в оценке эффективности местной иммуномодулирующей терапии.

Основные положения, выноснмые на защиту:

1.Хроническая форма конъюнктивита при аденовирусной инфекции глаз имеет ряд клинико-иммунологических особенностей. Острое течение аденовирусного конъюнктивита характеризуется наличием феномена усиления интенсивности симптомов в первую неделю заболевания на фоне применения стандартной схемы терапии.

2.Экспрессия генов цитокинов, характеризующая потенциальный цито-киновый ответ, а так же их фактический синтез осуществляется и здоровыми клетками конъюнктивы на достаточно высоком уровне. До начала лечения как при острой, так и при хронической форме течения инфекции выявлены сходные уровни экспрессии генов клетками конъюнктивы, отражающие схожий потенциальный цитокиновый ответ (р>0,05).

3.До начала лечения фактические концентрации практически всех исследуемых цитокинов, продуцируемых клетками конъюнктивы, достоверно отличаются в группах с острым (группа А) и хроническим аденовирусным конъюнктивитом (группа В) и имеют разные векторы изменения по сравнению с нормой.

4.Сравнительный анализ видового и количественного состава микрофлоры конъюнктивы при острой и хронической формах аденовирусной инфекции глаз не вьивляет достоверных различий между группами А и В и обнаруживает отсутствие значимого влияния бактериального присутствия как

на интенсивность симптомов воспаления конъюнктивы, так и на локальный цитокиногенез.

Апробация работы проведена на совместной научно-клинической конференции кафедры офтальмологии ГБОУ ДПО РМАПО Минздравсоцразви-тия России и сотрудников Офтальмологической клинической больницы Департамента здравоохранения г. Москвы (протокол № 6 от 2 марта 2012 г).

Основные положения диссертации опубликованы в 8 печатных работах, из них 3 — в ведущих рецензируемых научных офтальмологических журналах.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 123 страницах машинописного текста, состоит из введения, 3 глав (обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований), обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 20 таблицами. Список литературы включает 56 отечественных и 62 иностранных источника.

Материалы и методы

Клинические методы исследования

Нами проведен анализ клинических и лабораторных данных пациентов с аденовирусной инфекцией глаз, обратившихся в отделение неотложной помощи Московской офтальмологической клинической больницы и в городскую поликлинику № 33 ЮЗАО (г. Москва) за период 2009-2011 год.

Под наблюдением находилось 105 пациентов с аденовирусной инфекцией глаз в возрасте от 21 до 84 лет, из них женщин — 67 (68,8%), мужчин — 38 (32,2%). Средний возраст составил 44,9±18,2. Возрастная структура пациентов представлена в таблице 1.

Таблица 1. Возрастная структура пациентов, включепных в исследование.

Возраст Средний возраст Количество пациентов (%) Мода (наиболее часто встречаемый возраст)

17-29 24,8±4,2 22,8 25

3(М1 34,0£4,1 24,8 30

44-54 48,4±3,7 26,7 46

59-84 70,3±9,3 25,7 72

Все пациенты приглашались на осмотр, в среднем, 1 раз в педелю. В редких случаях (15,0%), в силу выраженной интенсивности симптомов, пациенты приглашались чаще одного раза в неделю для коррекции назначенной терапии. С целью мониторинга устойчивости отдаленного результата противовирусного лечения средний срок наблюдения составил 63±9,2 дня. К третьему визиту (14 день заболевания) у всех пациентов наблюдалась существенная редукция клинической картины и отчетливая тенденция к выздоровлению. Принимая во внимание этот факт, а также большой массив иммунологических параметров, лабораторное исследование ограничилось тремя точками забора материала для исследований — 1-м, 7-м и 14-м днями заболевания.

При каждом визите всем пациентам проводилось стандартное офтальмологическое обследование, измерение температуры (при необходимости), осмотр полости рта и зева, пальпацию предушных, подчелюстных и шейных лимфатических узлов.

Офтальмологическое обследование включало визометрию, пальпаторное определение внутриглазного давления, биомикроскопию, офтальмоскопию для исключения острых патологических изменений сетчатки. Более детально обследование не проводилось в связи с выраженностью клинической симптоматики и невозможностью корректной оценки результатов других методов исследования.

Исследовали состояние век, конъюнктивы, роговицы, влаги передней камеры. При этом, обращали особое внимание на цвет и консистенцию кожи век, на состояние желез и на края век. В некоторых случаях при сильном отеке век, для выворачивания верхнего века пользовались векоподъемником Демара.

При исследовании конъюнктивы обращали внимание на ее цвет, прозрачность, гладкость и на наличие фолликулов, пленок, сосочков, кровоизлияний, отделяемого и рубцов. Вовлечение роговицы в патологический процесс подкрепляли ее окрашиванием 2% раствором флюоресцеина натрия.

Читайте так же:  Проходит ли дакриоцистит самостоятельно

У всех пациентов фиксировали жалобы, собирали анамнез, осуществляли тщательное клиническое наблюдение. На каждого пациента заводили индивидуальную карту.

Все пациенты были разделены на две группы в зависимости от характера течения заболевания. Критерием хронического течения заболевания считали сохранение жалоб в течение трех и более месяцев при трехкратном положительном анализе на АДВ.

Первую группу (А) составили пациенты с острой формой аденовирусной инфекции глаз (п = 45), вторую (В) — пациенты с хронической и затяжной формой (и = 60).

Всем пациентам как группы А, так и группы В было назначено комплексное лечение, включающее противовирусные инсталляции (Офтальмо-ферон, производство Россия, «Фирн-М»). Кратность назначения Офтальмо-ферона в группе с острым течением аденовирусной инфекции глаз составляла 6-8 раз в день (согласно инструкции по использованию препарата). По мере стихания интенсивности симптомов конъюнктивита кратность инсталляций уменьшали до 3-4 раз в день. Схема лечения Офтальмофероном пациентов с хронической формой течения инфекции была несколько иной: с первого по седьмой день заболевания кратность назначения составляла 3—4 раза в день с последующим снижением количества инсталляций до 2-3 раз в день по мере стихания клинических симптомов. Режим назначения антимикробной и противовоспалительной терапия как при острой форме течения адено-

вирусной инфекции глаз, так и при хронической был одинаковым. При отсутствии гнойного отделяемого и профилактики развития вторичной инфекции назначали антисептический препарат Окомистин 0,1% (производство Россия, ООО «Славянская аптека»). Кратность — 4 раза в день в первую неделю заболевания, при стихании воспалительного процесса количество инсталляций снижали до 2—3 раз в сутки. При наличии слизисто-гнойного отделяемого применяли антибактериальный препарат фторхинолонового ряда — Ципромед 0,3% (производство Индия, Promed Exports Pvt. Ltd.). Режим инсталляций был аналогичен режиму назначения Окомистина. В качестве противовоспалительной терапии назначали нестероидное противовоспалительное средство (Индоколлир 0,1%, производство США, Baush+Lomb). В остром периоде — 4 раза в день, затем 2-3 раз в день при снижении интенсивности симптомов.

Назначение одних и тех же препаратов при различных формах течения инфекции продиктовано необходимостью получения единообразия результатов иммунологического исследования. Кроме того, для исключения влияния на иммунологическую картину исследований предшествующей терапии у пациентов группы В, всем пациентам этой группы было рекомендовано воздержаться от применения каких-либо местных офтальмологических противовирусных препаратов в течение трех дней. Средний срок лекарственной терапии в группе с острым течением инфекционного процесса составил 13±2,1 дней, с хроническим — 11±1,8 дней. Все пациенты были проинформированы о неосложненном ходе течения болезни и приглашались для корректировки лечения и проведения иммунологического исследования в среднем через 7 дней.

Группу контроля составили 60 здоровых добровольцев без признаков офтальмопатологии, с отсутствием анамнестических данных о перенесенных инфекциях глаз и с отрицательными результатами анализа на наличие ДНК аденовируса методом ПЦР.

Лабораторные методы исследования

Лабораторная диагностика проводилась на базе ФГБУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Минздравсоцразвития России, г. Москва, лаборатория микробиологии латентных инфекций. У всех пациентов диагноз аденовирусной инфекции подтвержден положительными результатами полимеразной цепной реакции (ПЦР) на наличие в конъюнктивальном соскобе ДНК АДВ. Для идентификации аденовируса применяли набор реагентов для амплификации ДНК-вирусов (Adenovirus) с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле (АмплиСенс Adenovirus—EPh). В пробирки с исследуемым материалом добавляли лизирующий раствор, тщательно перемешивали и прогревали при температуре 65°. Смесь центрифугировали 5 сек при 5000 об/мин на микроцентрифуге. Для выделения ДНК использовали на-досадочную жидкость, перенеся ее в новую пробирку. Пробирки помещали в термостат на 5-10 мин при температуре 65° для подсушивания сорбента. В пробирки добавляли ТЕ-буфер для элюции ДНК, перемешивали и снова помещали в термостат 65° на 5 мин. Центрифугировали пробирки при 12000 об/мин в течение 1 мин на микроцентрифуге. Для проведения ПЦР пробы помещали в амплификатор при температуре 95°. Затем продукты амплификации вносили в лунки агарозного геля. Время электрофореза составляло 18-20 мин при напряжении 250 В. По завершению времени электрофореза гель преносили на трансиллюминатор. Изображение геля получали на компьютере с помощью видеосистемы. Учет результатов ПЦР-анализа проводился по-наличию или отсутствию на электрофореграмме специфических полос ам-плификационных фрагментов ДНК.

Локальный цитокиновый статус изучали как по уровню экспрессии генов цитокинов, так и по содержанию самих цитокинов в конъюнктивальном соскобе. Изучение вышеуказанных параметров проводили параллельно в группах пациентов и у здоровых добровольцев. Исследование экспрессии генов 11 цитокинов (ИФН-а, ИФН-у, ИЛ-lß, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-б, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-18, ФНО-а) путем определения их матричной РНК (мРНК) проводили методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции

(ОТ-ПЦР). Тотальную клеточную РНК из тканей выделяли согласно методи-

ке, предложенной Chromezynsky Р. и Sacchi N. в 1987 году. Лизат переносили в чистую пробирку и добавляли равный объем смеси фенол-хлороформ-изоамиловый спирт (25:24:1). Смесь интенсивно встряхивали в течение 10 сек и затем центрифугировали суспензию при 12000 об/мин в течение 15 минут. Затем верхнюю водную фазу аккуратно отбирали, добавляли равный объем изопропанола и оставляли при —20°С па 6-8 часов. Далее, тотальную РНК осаждали, центрифугируя спиртовую смесь при 12000 об/мин в течение 15 минут. Супернатант удаляли. Осажденную РНК промывали охлажденным 75% этанолом, подсушивали при комнатной температуре в течение 5-6 минут и растворяли в 40 мкл стерильной воды. Хранили раствор РНК при — 70°С, предварительно добавив 2,5 объема 75% этанола и 0,2М ацетата натрия. После амплификации продукты ПЦР анализировали электрофоретиче-ски в 2,5% агарозном геле. В качестве позитивного контроля амплификации использовали ß-actin. Электрофорез кДНК проводили в 2,5% агарозном геле с бромистым этидием (0,5мкг/мл) в Трис—ацетатном буфере, содержащем 0.2 М ЭДТА. Электрофорез вели в течение 35 минут в камерах для горизонтального электрофореза фирмы «Bio-Rad». Фотографировали на пленку Ми-крат-500 под мягким (360 нм) ультрафиолетовым освещением. Для идентификации нуклеотидных последовательностей использовали маркер для электрофореза фирмы Promega.

Содержание 9 цитокинов в материале ( ИФН-у, ИЛ-5, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-13, ФНО-а, ГМ-КСФ) оценивали методом проточной флуо-метрии на двухлучевом лазерном автоматизированном анализаторе Bio-Plex Protein Assay System (пр-во «Bio-Rad», США) с использованием тест-систем в соответствии с инструкцией фирмы-производителя. На первом этапе образец инкубировали с микрочастицами, покрытыми антителами к различным цитокинам, отличающихся друг от друга по размеру и интенсивности фло-уресценции, и с биотилированными антителами. Затем образец очищали путем отмывки и добавляли конъюгат стрептавидин-фикоэритрин. После инкубации и отмывки образцы анализировали на проточном флуометре. Точные значения концентрации оценивали с помощью специального программ-

ного обеспечения, прилагаемого к набору. Метод позволяет производить количественную оценку в режиме реального времени в малом объеме образца (50 мкл) до 100 цитокинов. Для отдельных цитокинов была возможность проследить как уровень продукции генов, так и непосредственное их количество. . .

Материалом для исследования во всех случаях служили ьслетки конъ-юнктивального соскоба. Забор материала проводили у всех пациентов трехкратно (при первичном обращении, на 7-й и 14-й день наблюдения), у здоровых добровольцев забор материала осуществляли однократно. Манипуляцию проводили универсальным зондом после местной анестезии раствором про-ксиметакаина («Алкаин», Алкон, США), материал помещали в пробирку с 0,1 мл физиологического раствора, перемешивали и отстаивали 4 часа при комнатной температуре. Надосадочную жидкость использовали для тестирования.

Во всех случаях проводили микробиологическое исследование. Мазки, взятые с конъюнктивы, помещали в сывороточный бульон и затем доставляли в лабораторию, где проводили микроскопию исследуемого материала. Затем материал помещали в термостат при 37°С. На второй день изучали характер роста в бульоне, и проводили бактериологическое исследование с окраской по Грамму. В зависимости от морфологии микроорганизмов делали высевы на элективные питательные среды для выделения чистых культур с последующей идентификацией и определением чувствительности. При отсутствии роста в первые сутки, посевы оставляли в термостате и ежедневно просматривали их. При обнаружении роста производили соответствующие отсевы. Окончательный результат об отсутствии роста определяли через трое суток.

Статистическая обработка результатов

Статистическая обработка результатов была произведена при помощи

пакета SPSS Statistics 19. Для сравнения частот экспрессии генов цитокинов

между группами использовался критерий независимости х2 Пирсона, и Q-

тест Кохрана для анализа различий по визитам внутри каждой из групп. Ста-

тистическая достоверность различий количества цитокинов подтверждалась использованием критерия в модификации Краскела-Уолеса в исследуемых группах и критерия Манна-Уитни для попарного сравнения 1рупп. Критерий Фридмана использовался для сравнения количественного содержания цитокинов в динамике (по визитам). Для выявления статистически значимых связей создавали таблицы сопряженности и проводили корреляционный анализ с использованием коэффициентов Пирсона и тау-Кендалла. Результаты считались статистически достоверными при р 0,05).

3. До начала лечения фактические концентрации практически всех исследуемых цитокинов, продуцируемых клетками конъюнктивы, достоверно отличаются в группах с острым (группа А) и хроническим аденовирусным конъюнктивитом (группа В) и имеют разные векторы изменения по сравнению с нормой.

4. Сравнительный анализ видового и количественного состава микрофлоры конъюнктивы при острой и хронической формах аденовирусной инфекции глаз не выявляет достоверных различий между группами А и В и обнаруживает отсутствие значимого влияния бактериального присутствия как на интенсивность симптомов воспаления конъюнктивы, так и на локальный ци-токиногенез.

Основные положения диссертации были представлены на конференциях российского и регионального уровня:

• X Всероссийской школе офтальмологов (Москва, 2011);

• XI Всероссийской школе офтальмологов (Москва, 2012);

• Совместной научно-практической конференции кафедры офтальмологии и сотрудников Офтальмологической клинической больницы г. Москвы (Москва, 2012).

По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, из них 3 в журналах, входящих в перечень ВАК ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертации на соискание ученой степени кандидата наук.